草酸銨結(jié)晶紫染色液是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合，從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色。

　　

　　染色液主要由草酸銨、結(jié)晶紫、乙醇等組成。革蘭陽(yáng)性菌染色中，細(xì)胞經(jīng)草酸銨結(jié)晶紫染色后再經(jīng)Gram碘液處理，形成不溶性復(fù)合物，該復(fù)合物不能通過(guò)細(xì)胞壁，不易被脫色，所以保持紫色。

　　

　　草酸銨結(jié)晶紫染色液操作步驟(僅供參考)：

　　

　　1、涂片：取待檢細(xì)菌，于載玻片中央涂成薄層或者在載玻片上滴加少許無(wú)菌水，取菌與水混合均勻，涂成薄層。

　　

　　2、干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥。

　　

　　3、固定：手持載玻片一端，標(biāo)本面朝上，在酒精燈的火焰外側(cè)快速來(lái)回移動(dòng)3~5次，每次1s，溫度不宜過(guò)高，防止菌體蛋白變性，放置待涼后染色。也可以用甲醇戒乙醇固定。

　　

　　4、初染：滴加結(jié)晶紫染色液染色1-2min，清水沖洗去染色液。

　　

　　5、媒染：滴加Gram碘液，并覆蓋載玻片室溫放置1-2min，水洗。

　　

　　6、脫色：滴加脫色液搖動(dòng)，搖動(dòng)10～30s，直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色為止，立即用水沖去脫色液，終止反應(yīng)。

　　

　　7、復(fù)染：滴加沙黃染色液染色，30~60s，水洗。

　　

　　8、干燥。鏡檢：置油鏡觀察。

　　

　　染色結(jié)果：革蘭氏陽(yáng)性菌：藍(lán)色至紫色；革蘭氏陰性菌：紅色。

　　

　　草酸銨結(jié)晶紫染色液的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度，脫色時(shí)間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷。脫色過(guò)度，陽(yáng)性菌可被誤染為陰性菌；脫色不夠，陰性菌可被誤染為陽(yáng)性菌。