什么狀態(tài)下菌體質粒DNA充分釋放？

如何用試劑盒提取出質量更好的質粒?

看了上一期的“滿滿的干貨（一）"，大家對于質粒DNA的濃度分析應該會有一定程度的了解，那么下面首先給大家介紹一下，如何用試劑盒提取出質量更好的質粒。

首先，質粒提取的好壞，除了對吸附柱特異性要求以外，操作過程也非常重要，比如菌體的裂解程度，直接導致質粒DNA釋放充分釋放，很多人會在裂解這一步無法判斷自己是否裂解充分，下面結合圖片給大家簡單介紹一下。

菌液量較少時，溶液趨于透明狀態(tài)（非充分透明），即停止裂解，避免裂解過度。

菌液量較大時，菌體會裂解到半透亮狀態(tài)（輕微渾濁），此時可以延長下裂解時間，或者適當增加裂解液的用量，當對著燈光觀察，液體內部無霧狀或渾濁狀沉淀出現，整體成均一性的透亮狀態(tài)（非透明），即停止裂解。

以上圖片為裂解充分和不充分的結果對比。

以上是展示的索萊寶產品所提取的高質量質粒電泳圖例。

通過測定不同廠家試劑盒提取的質粒濃度，發(fā)現Q公司的質粒濃度最高，但經瓊脂糖凝膠電泳，結果條帶亮度不如Solarbio和T公司，而且A260/A280>2.0，說明有RNA污染，導致濃度偏高。因此可以說明必須將濃度和電泳結果一塊對比才可以確定質粒的質量。

索萊寶質粒提取試劑盒產品列表