儲存條件
2-8℃
酪*酸解氨酶（TAL）活性檢測試劑盒抗氧化
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Tyrosine Ammonia-lyase (TAL) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號：BC4060-50T/48S

更新時間：2024-04-12

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：757

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

酪*酸解氨酶（TAL）活性檢測試劑盒說
明書
紫外分光光度法
貨號：BC4060
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體40 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2瓶	2-8℃保存

溶液的配制：
試劑二：臨用前取1瓶加入5 mL蒸餾水和20 μL濃鹽酸（37%）充分溶解待用?，F(xiàn)配現(xiàn)用。2-8℃保存4周。
產(chǎn)品說明：
酪*酸解氨酶（TAL）廣泛存在于植物和微生物中，是苯丙*酸次生代謝途徑的關(guān)鍵酶之一。TAL能夠躍過肉桂酸-4-羥基化酶（C4H）直接將酪*酸轉(zhuǎn)化為香豆酸，香豆酸可進一步生成白藜蘆醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素類天然產(chǎn)物。
TAL能夠分解酪*酸產(chǎn)生香豆酸，其在310nm下有吸收峰，根據(jù)吸光度的變化率可計算出TAL活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、細胞超聲破碎儀、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰、濃鹽酸（37%）和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
1、組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、細胞或細菌：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬細胞或細菌加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率200w，超聲3s，間隔10s，重復30次）。12000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
二、測定步驟

紫外分光光度計預(yù)熱30min以上，波長調(diào)至310nm，蒸餾水調(diào)零。
加樣表（在1mL石英比色皿中分別加入）

試劑名稱（μL）	測定管
試劑一	700
試劑二	200
樣本	100

將上述試劑分別加入比色皿后迅速吹打混勻，記錄第10s的吸光值A1，迅速置于37℃（哺乳動物）或25℃（其他物種）水浴或培養(yǎng)箱中3min，拿出迅速擦干測定3min10s時的吸光值A2，計算ΔA =A2 -A1。
三、TAL酶活計算
1、按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘在310nm下吸光值變化0.01定義為一個酶活性單位。
TAL（U/mg prot）=ΔA÷0.01×V反總÷(V樣×Cpr)÷T=333×ΔA÷Cpr
2、按樣本質(zhì)量計算：
單位的定義：每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘在310nm下吸光值變化0.01定義為一個酶活性單位。
TAL（U/g 質(zhì)量）=ΔA÷0.01×V反總÷(W÷V提取×V樣)÷T=333×ΔA÷W
3、按細胞或細菌數(shù)量計算：
單位的定義：每10⁴個細胞或細菌在反應(yīng)體系中每分鐘在310nm下吸光度變化0.01定義為一個酶活性單位
TAL（U/10⁴ cell）=ΔA÷0.01×V反總÷(500÷V提取×V樣)÷T=0.667×ΔA
V反總：反應(yīng)總體積，1mL；V樣：加入的樣本體積，0.1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；V提?。禾崛∫后w積，1mL；500：500萬個細胞；T：反應(yīng)時間，3min。
注意事項：
當ΔA大于0.2或者A1大于1.5時，建議將樣本用蒸餾水稀釋后測量；ΔA過小時，建議增加酶促反應(yīng)時間（5min或10min）或增加加入的樣本體積來測定。計算時注意同步修改計算公式。（計算時注意同步修改計算公式）
實驗實例：

取0.1g稗草葉加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清稀釋3倍后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A2-A1=0.253-0.243=0.01，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

TAL（U/g 質(zhì)量）=333×ΔA÷W×F（稀釋倍數(shù)）=333×0.01÷0.1×3=99.9 U/g 質(zhì)量。
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