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人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒科研
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人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒科研產品種類齊全、現(xiàn)貨供應、質量長期保障,歡迎各位新老客戶惠顧,如需咨詢相關產品信息或產品詳細說明請致電聯(lián)系或聯(lián)系在線客服

產品型號:fk0833Y

更新時間:2022-08-12

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中文名稱:人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒科研

操作程序:

加抗體包被 → 4℃**,洗滌三次、拋干

加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液

⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值

人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒科研顯色的重要性

顯色是ELISA中的后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間,及時判斷。

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產物用酸終止后,顯色由橙黃色轉向棕黃色。

TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當時間閱讀結果。TMB經HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,2小時后即可*消退無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。

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