唾液酸（SA）含量檢測試劑盒

微量法

貨號：BC5365

規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

標(biāo)準(zhǔn)品：4mmol/L唾液酸標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：

唾液酸（Sialic acid，SA），又稱N-乙酰神經(jīng)氨酸，是細(xì)胞膜上糖蛋白和糖脂的重要成分，其廣泛的存在于生物體中，參與細(xì)胞表面的多種生理功能。

唾液酸在氧化劑存在的情況下與5-甲基間*酚形成紫紅色絡(luò)合物，其在560nm處有最大吸收峰，通過測定產(chǎn)物在560nm的吸光值，可以計(jì)算出唾液酸含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、96孔板/微量玻璃比色皿、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：

1、 100℃沸水浴溫度比較高，建議使用封口膜為離心管纏口，或使用螺旋蓋的離心管。

2、 ΔA測定的測定范圍在0.01-0.7之間。如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以用蒸餾水稀釋樣本后再次測定，如果測定吸光值小于線性范圍吸光值，需要增加樣本量后再次測定，注意同步計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、 吸取10μL牛血清，按照測定步驟操作，用96孔板測得A測定 = 0.227，A空白 = 0.046，?A測定= 0.181，A標(biāo)準(zhǔn)=0.346，?A標(biāo)準(zhǔn)=0.3。按液體樣本體積計(jì)算唾液酸含量得：

唾液酸含量（mmol/L）= 4×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=2.41 mmol/L。

2、 吸取10μL血漿，按照測定步驟操作，用96孔板測得A測定 = 0.196，A空白 = 0.046，?A測定= 0.15，A標(biāo)準(zhǔn)=0.3465，?A標(biāo)準(zhǔn)=0.3。按液體樣本體積計(jì)算唾液酸含量得：

唾液酸含量（mmol/L）= 4×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=2.0 mmol/L。

3、 稱取0.123g小鼠肝臟，加入1mL提取液，冰浴勻漿，離心后取上清，按照測定步驟操作，用96孔板測得A測定= 0.088，A空白= 0.046，?A測定= 0.042，?A標(biāo)準(zhǔn)=0.3。按樣本質(zhì)量計(jì)算唾液酸含量得：

唾液酸含量（mmol/g 質(zhì)量）=0.004×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.0046 mmol/g 質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)：

[1] Yongpoovorawan, S. O. C. Role of serum total sialic acid in differentiating cholangiocarcinoma from hepatocellular carcinoma[J]. World Journal of Gastroenterology,2003,9(10):2178-2181.

[2] Lu yiqin, Glycophorin variants and contents of sialic acid and total sulfhydryl groups on erythrocyte membranes of residents in a malaria hyperendemic area[J]. Chinese Medical Journal,1998,111(7):606-609.

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