HEPES. 氨基酸與蛋白質(zhì)

HEPES緩沖液是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用到的緩沖液。在開(kāi)放式的培養(yǎng)條件中，加入HEPES緩沖液，可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高，從而將PH維持在7.0左右。那么，HEPES緩沖液的配制步驟和方法是怎樣的，下面就給大家詳細(xì)介紹。

HEPES分子量為238.31，，分子式: C8H18N2O4S。

HEPES常用于生物緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2，用在生化診斷試劑盒、DNA/rna提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。

關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制，不同的文獻(xiàn)資料有不同的說(shuō)法。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下：

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液調(diào)節(jié)少所需pH(HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容500ml，于4攝氏度保存。

二、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液調(diào)節(jié)pH值，后定容。

三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制

將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水，用0.5M NaOH調(diào)節(jié)所需pH值，再用蒸餾水定容100ml即可。

生物緩沖試劑，可用于配制蛋白提取緩沖液、細(xì)胞培養(yǎng)用緩沖液等。有效緩沖范圍為pH6.8-8.2。

HEPES. 氨基酸與蛋白質(zhì)

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